Microscopie STED 4Pi

Le microscope 4Pi-STED est le résultat de la combinaison de deux concepts indépendants de microscopie à émission stimulée (STED) et de microscopie 4Pi . Ici, un échantillon fluorescent est placé dans le foyer commun de deux lentilles opposées , mais l'excitation et la détection sont effectuées à travers une seule lentille (mode A 4Pi). L' impulsion d'excitation verte est immédiatement suivie d'une impulsion STED rouge, qui pénètre dans la région focale à travers les deux lentilles, induisant une émission stimulée des molécules fluorescentes excitées vers l' état fondamental . Pour permettre l'émission de fluorescence depuis le centre mais la supprimer des régions voisines, il est utile de déphaser le faisceau STED pour avoir un minimum au centre.