Spectrofluorimètre

Un spectrofluorimètre est un instrument qui exploite les propriétés fluorescentes de certains composés afin de fournir des informations sur leur concentration et leur environnement chimique dans un échantillon. Une certaine longueur d'onde d'excitation est sélectionnée et l'émission est observée soit à une seule longueur d'onde, soit un balayage est effectué pour enregistrer l'intensité en fonction de la longueur d'onde, également appelée spectre d'émission. L'instrument est utilisé en spectroscopie de fluorescence .

En général, les spectrofluorimètres utilisent des sources lumineuses de haute intensité pour bombarder un échantillon avec autant de photons que possible. Cela permet au plus grand nombre de molécules d'être dans un état excité à un moment donné. La lumière passe soit à travers un filtre, sélectionnant une longueur d'onde fixe, soit un monochromateur , qui permet de sélectionner une longueur d'onde d'intérêt à utiliser comme lumière d'excitation. L'émission est collectée perpendiculairement à la lumière émise. L'émission passe également à travers un filtre ou un monochromateur avant d'être détectée par un tube photomultiplicateur , une photodiode ou un détecteur à dispositif à couplage de charge . Le signal peut être traité comme une sortie numérique ou analogique.

Les systèmes varient considérablement et un certain nombre de facteurs influencent le choix. Le premier est le rapport signal/bruit. Il existe de nombreuses façons d'examiner le rapport signal/bruit d'un système donné, mais la norme acceptée consiste à utiliser le signal Raman de l'eau. La sensibilité ou la limite de détection est une autre spécification à prendre en compte, c'est-à-dire la quantité de lumière pouvant être mesurée. La norme serait la fluorescéine dans NaOH , les valeurs typiques pour un instrument haut de gamme étant de l'ordre du femtomolaire.

Ces systèmes sont dotés de nombreuses options, notamment :

• Polariseurs
• Contrôleurs de température Peltier
• Cryostats
• Dewars à doigts froids
• Lasers pulsés pour des mesures de durée de vie
• Des LED pour une durée de vie prolongée
• Porte-filtres
• Optique réglable (très important)
• Porte-échantillons solides
• Porte-diapositives
• Sphères intégratrices
• Détecteurs proche infrarouge
• Fentes bilatérales
• Fentes manuelles
• Fentes contrôlées par ordinateur
• Monochromateurs à commutation rapide
• Roues filtrantes